本文是由新疆医科大学第一附属医院的加孜那.托哈依开展的研究，旨在探讨人参皂甙Rg3对吉非替尼敏感性不同的两种NSCLC细胞株在改变细胞增殖、凋亡和迁移方面是否增强吉非替尼的作用。研究表明人参皂苷Rg3可增强吉非替尼的抗癌活性，使NSCLC细胞对吉非替尼更敏感。

材料和方法 

●细胞凋亡的流式细胞术分析。将A549或H1299细胞隔夜培养。孵育后，用10μM吉非替尼在37℃下处理细胞48小时,然后用Annexin V-荧光素异硫氰酸盐（FITC）/碘化丙二钠（PI）双染色试剂盒进行染色。使用流式细胞仪测量凋亡细胞，并使用FlowJo软件分析数据。 

●跨井迁移分析：用10μM吉非替尼在37°C下预处理细胞24小时，收集在不含FBS的培养基中。在不含FBS的RPMI-1640培养基中，共有1x105 A549或H1299细胞在上腔中被镀，在下腔中镀600微升RPMI-1640培养基并添加20%FBS。跟随将移行细胞在室温下用4%多聚甲醛固定15min，PBS洗涤2次，室温下用0.05%结晶紫染色10min，用棉签去除未分化细胞，计数染色移行细胞。 

●Western blot分析。A549或H1299细胞培养基中培养过夜。随后，用10μM吉非替尼在37℃下处理细胞48小时。使用放射免疫-ciption分析缓冲液从细胞中提取总蛋白。总蛋白采用双辛酸测定法定量，40μg蛋白质/lane在10%凝胶上通过SDS-PAGE分离。分离的蛋白质被转移到0.45mm的Immobilon-P聚偏二氟乙烯膜上。在室温下，将膜封闭在5%无脂牛奶中1h，并在4°C下用抗裂解半胱天冬酶孵育过夜。孵育后，用辣根过氧化物酶标记的二级抗体，室温下放置1小时。观察蛋白质条带™ ECL Western Blotting底物。使用ChemiDocTM XRS+系统分析印迹。 

●统计分析。数据表示为平均值±标准差。所有统计分析均使用GraphPad Prism软件进行。采用单因素方差分析法进行统计分析，然后进行Bonferroni校正。P<0.05表示有统计学意义的差异。

结果
 

细胞凋亡的流式细胞术分析： 

与对照组和吉非替尼组相比， gefitinib+Rg3联合治疗显著增强了gefitinib诱导的A549及H1299细胞的凋亡。（图1A、1B）

跨井迁移分析： 

与对照组和吉非替尼组相比， gefitinib+Rg3联合治疗显著增强了对gefitinib诱导的A549及H1299细胞迁移抑制作用。（图2A、2B）。

Western blot分析: 

吉非替尼+Rg3联用可提高促凋亡蛋白Bax和裂解caspase-3的蛋白表达水平，降低抗凋亡蛋白Bcl-2的蛋白表达水平。与对照组相比，吉非替尼和Rg3联合治疗提高了抗迁移蛋白E-cadherin的蛋白表达水平，降低两种促迁移因子SNAIL和SLUG的蛋白表达水平。（图3A和3B）
 

结论 

人参皂苷Rg3可能能够增强吉非替尼的抗癌活性，增强吉非替尼诱导的细胞毒性、细胞凋亡和迁移抑制因子。使NSCLC细胞对吉非替尼更敏感。

本文文献来源：

Dai Yuemei,Wang Wenran,Sun Qingchao,Tuohayi Jiazina.

Ginsenoside Rg3 promotes the antitumor activity of gefitinib in lung cancer cell lines[J]. Experimental and therapeutic medicine,2019,17.